Kun solut, joissa viljelemme

solujen tehdasovat saastuneet, useimpia niistä on vaikea käsitellä.Jos kontaminoituneet solut ovat arvokkaita ja niitä on vaikea saada takaisin, ne voidaan poistaa seuraavilla menetelmillä.

1. Käytä antibiootteja

Antibiootit ovat tehokkaampia bakteerien tappamisessasolutehtaita.Yhdistelmälääkitys on tehokkaampaa kuin pelkkä lääkitys.Ennaltaehkäisevä lääkitys on tehokkaampaa kuin lääkitys saastumisen jälkeen.Ennaltaehkäisevä lääkitys käyttää yleensä kaksoisantibioottia (penisilliiniä 100 u/ml plus streptomysiiniä 100 µg/ml).Likaantumisen jälkeen puhdistusmenetelmän on oltava 5-10 kertaa tavallista suurempi.Lääkettä tulee käyttää 24-48 tunnin ajan lisäämisen jälkeen, minkä jälkeen se korvataan tavallisella rutiinilla.Kulttuurineste.Tämä menetelmä voi olla tehokas saastumisen alkuvaiheessa.Penisilliinin ja streptomysiinin lisäksi käytettyjä antibiootteja voivat olla myös gentamysiini, kanamysiini, polymyksiini, tetrasykliini, nystatiini jne. Yleisesti käytettyjä ovat 400-800 µg/ml kanamysiiniä tai 200 µg/ml tetrasykliiniä.Elatusaine vaihdetaan 2-3 päivän välein ja siirretään 1-2 sukupolven ajan hoitoa varten.Viime vuosina on raportoitu, että 4-fluori-, 2-hydroksikinoliini (Ciprofloxacin, Cip), Pleu-romutiliinijohdannainen (Pleu-romutiliinijohdannainen, BM-Cyclin2: BM-1 ja tetrasykliinijohdannainen (BM-2)) Antibiootit ovat tehokas mykoplasman tappamisessa, kun sitä käytetään yksinään tai yhdistelmänä.Nämä kolme antibioottia valmistetaan kaikki 250-kertaisiksi väkevöityiksi liuoksiksi PBS:ssä ja säilytetään -20 °C:ssa myöhempää käyttöä varten.Käyttöpitoisuus Cip on 10 μg/ml, BM-1 on 10 μg/ml ja BM-2 on 5 μg/ml.Kun käytät, ime ensin kontaminoitunut elatusaine, lisää BM-1:tä sisältävää RPMI1640-viljelyalustaa, ime elatusaine 3 päivän kuluttua, lisää BM-2:ta sisältävää RPMI1640-viljelyalustaa ja viljele 4 päivää ja niin edelleen 3 peräkkäisenä päivänä. .kierrosta, kunnes 33258 fluoresoivalla värjäysmikroskopialla osoitetaan, että mykoplasma on eliminoitu, sitten lisätään normaalia viljelyalustaa viljelyä ja siirtoa varten 3-4 kertaa.

2. Lämmityskäsittely

Saastuneen kudosviljelmän inkubointi 41 °C:ssa 18 tunnin ajan voi tappaa mykoplasman, mutta sillä on haitallisia vaikutuksia soluihin.Siksi ennen hoitoa on suoritettava alustava testi, jotta voidaan selvittää kuumennusaika, joka voi tappaa mykoplasman mahdollisimman paljon ja vaikuttaa vähiten soluihin.Tämä menetelmä on joskus epäluotettava.Jos käsitellään ensin lääkkeillä ja sitten kuumennetaan 41 °C:seen, vaikutus on parempi.

3. Käytä mykoplasmaspesifistä seerumia

Mykoplasmakontaminaatio voidaan poistaa 5 % kanin mykoplasma-immuuniseerumilla (hemagglutinaatiotiitteri 1:320 tai enemmän).Koska spesifinen vasta-aine voi estää mykoplasman kasvua, se muuttuu negatiiviseksi 11 päivää antiseerumihoidon jälkeen ja pysyy negatiivisena 5 kuukautta myöhemmin.on negatiivinen.Tämä menetelmä on kuitenkin hankalampi eikä yhtä kätevä ja taloudellinen kuin antibioottien käyttö.

4. Muut menetelmät

Edellä mainittujen kontaminaation poistomenetelmien lisäksi on olemassa myös eläimille rokotus- ja sterilointimenetelmiä, makrofagifagosytoosimenetelmiä, bromourasiilin lisäämismenetelmiä kontaminoituneeseen aineeseen.kulttuuripullojaja sitten säteilyttää niitä valolla ja suodatusmenetelmillä jne., mutta ne ovat kaikki hankalampia ja tehottomempia.Sen vuoksi, kun mykoplasmakontaminaatio tapahtuu, ellei sillä ole erityisen tärkeää arvoa, se yleensä hylätään ja viljellään uudelleen.

ota yhteyttä Whatsapp & Wechatiin: +86 180 8048 1709